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植物1,5-二磷酸核酮糖羧化酶(RuBisCO)ELISA试剂盒说明书
TZXD-4938 植物1,5-二磷酸核酮糖羧化酶(RuBisCO)ELISA试剂盒
一、产品概述
检测原理:采用双抗体夹心法(ELISA)检测样本中RuBisCO含量,通过HRP酶催化底物显色,颜色深浅与目标物浓度正相关。
适用样本:植物组织匀浆、叶片提取液、细胞裂解液等。
检测范围:通常为0.1–50 ng/mL(不同品牌可能略有差异)。
二、试剂盒组成
组分 规格(96T) 保存条件
包被微孔板 12孔×8条 2–8℃干燥
RuBisCO标准品 0.3 mL×6管(浓度梯度) -20℃长期保存
HRP标记检测抗体 10 mL×1瓶 避光2–8℃
TMB显色液 A/B液各6 mL 避光2–8℃
终止液 6 mL×1瓶(2M H₂SO₄) 室温
20×洗涤缓冲液 25 mL×1瓶(需稀释) 2–8℃
(注:48T规格用量减半)
三、操作步骤
样本制备
植物组织:按质量比1:5–1:10加入PBS匀浆,1000×g离心20分钟取上清。
避免使用含NaN₃的缓冲液(抑制HRP活性)。
检测流程
步骤1:加入标准品或样本(100 μL/孔),37℃孵育1小时。
步骤2:洗涤5次(每孔加满洗涤液,静置30秒后甩干)。
步骤3:加入HRP标记抗体(50 μL/孔),37℃孵育30分钟。
步骤4:再次洗涤,加入TMB显色液(各50 μL/孔),避光反应15分钟。
步骤5:加入终止液(50 μL/孔),立即用酶标仪测定450 nm OD值。
结果计算
以标准品浓度对数与OD值绘制标准曲线,回归方程计算样本浓度。
四、注意事项
质量控制:板内/板间变异系数应<10%,标准曲线R²≥0.99。
保存条件:未开封试剂盒2–8℃保存6个月;开封后标准品及抗体需-20℃保存。
干扰因素:高色素样本(如叶绿素)可能需额外离心或稀释。
五、技术参数
灵敏度:通常≤0.1 ng/mL。
特异性:不与植物其他羧化酶交叉反应。
价格范围:48T约1200–1980元,96T约1800–3000元。
(如需详细品牌说明书或技术支持,可联系供应商获取。)
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