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多糖多酚复杂植物RNA快速提取试剂盒
产品信息
产品名称 产品编号 规格
多糖多酚复杂植物RNA快速提取试剂盒 HRN040 50T
产品描述
本产品是无bf或氯仿的RNA的提取试剂盒,组分中包含的基因组DNA清除柱可以有效清除gDNA残留,获得的RNA不需要DNase消化,可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。组分中的裂解液能快速裂解细胞和灭活细胞的RNA酶, 离心沉淀去除多糖多酚和次级代谢产物,获得的裂解混合物用乙醇调节RNA结合吸附到基因组DNA清除柱上,然后RNA被选择性洗脱滤过,吸附在基因组DNA清除柱上的残留DNA不会被洗脱。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
产品特点
1.不使用有毒的bf,氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.简捷,单个样品操作一般可在25分钟内完成。
3.基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留,得到的RNA不需要DNase消化,可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
4.可以提取包括复杂中草药如石斛/丹参/雪莲/人参、复杂淀粉种子如水稻/小麦/玉米种子、复杂果实如葡萄/蓝莓/草莓/西瓜果实、复杂抗逆植物如冬青/松针/沙棘/胡杨、复杂花卉月季/玫瑰/梅/牡丹花、复杂多糖植物紫菜/仙人掌/芦荟/百合鳞茎/水稻种子等数样品。
5.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值高达2.1~2.2,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot,二代测序和各种实验。
运输和保存方法
1)本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
2)不合适的储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。
3)避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项
1.所有的离心步骤均可在室温完成(4℃离心也可以),使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.需要自备β-巯基乙醇,乙醇,研钵(可选)。
3.样品处理量绝对不要超过基因组清除柱DA和和RNA吸附柱RA处理能力,否则造成DNA残留或产量降低。开始摸索实验条件时,如果不清楚样品DNA/RNA含量时可使用较少的样品处理量,将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
4.裂解液CLB和RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5.关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法避免DNA的微量残留(DNase消化也无法做到100%无残留),本公司的RNA提取产品,由于采取了本公司的缓冲体系和基因组DNA清除柱技术,绝大多数DNA已经被清除,不需要DNase消化,可直接用于反转录PCR和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA表达量分析荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1)选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2)选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3)将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁(cleanup) ,请联系我们索取具体操作说明书。
4)在步骤去蛋白液RW1漂洗前,直接在吸附柱RA上进行DNase I柱上消化处理。购买DNA酶柱上消化试剂盒(货号:RN34)前可先索取具体操作说明书。
6.本产品仅作科研用途!
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