过氧化氢含量（H2O2）试剂盒 天津天正信达供应 核酸染料是一种超灵敏、极其稳定且对环境安全的荧光核酸染料，可替代剧毒的溴化乙锭 (EB)， 核酸染料是一种的油性大分子，不能穿透细胞膜进入细胞内。

　　产品信息

　　产品名称测定方法产品编号规格

　　过氧化氢含量（H2O2）试剂盒 分光光度法HRK052150管/48样

　　正式测定前取2-3个预期差异较大的样本做预测定

　　测定意义

　　H2O2是生物体内最常见的活性氧分子，主要由SOD和XOD等催化产生，由CAT和POD等催化降解。H2O2不仅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互转化的枢纽。一方面，H2O2可以直接或间接地氧化细胞内核酸，蛋白质等生物大分子，并使细胞膜遭受损害，从而加速细胞的衰老和解体;另一方面H2O2也是许多氧化应急反应中的关键调节因子。

　　测定原理

　　H2O2与硫酸钛生成黄色的过氧化钛复合物，在415nm有特征吸收。

　　需自备的仪器和用品

　　可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、丙酮60mL、浓盐酸10mL、研钵和冰。

　　试剂的组成和配制

　　试剂一：丙酮60mL×1瓶，4℃保存;(自备)

　　试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存;临用前加入10mL浓盐酸充分溶解备用。用不完的试剂4℃保存;(溶解时间较长，约30min，可40℃-60℃加热溶解，务必提前准备)

　　试剂三：15mL×1瓶，4℃保存;

　　试剂四：60mL×1瓶，4℃保存;

　　H2O2提取

　　1、细菌或细胞样品的制备：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个)：试剂一体积(mL)为500~1000：1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一)，超声波破碎细菌或细胞(冰浴，功率20%或200W，超声3s，间隔10s，重复30次);用试剂一定容至1mL;8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

　　2、组织样品的制备：按照组织质量(g)：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例(建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆;转移至EP管中，用试剂一定容至1mL，8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

　　3、血清(浆)样品：直接检测。

　　测定步骤

　　1.分光光度计预热30min以上，调节波长至415nm，蒸馏水调零。

　　2.将试剂二、三和四37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴10min以上。

　　3.在EP管中按顺序加入下列试剂

　　试剂名称(μL)测定管对照管

　　样本吸取的量的为全部上清液

　　试剂一1000

　　试剂二100100

　　试剂三200200

　　4000g，25℃离心10min，弃上清，留沉淀

　　试剂四10001000

　　加入试剂四溶解沉淀后，室温静置5min，倒入比色皿中，测定415nm处吸光值A。对照管只要做一次即可。计算ΔA=A测定-A对照。

　　注意事项

　　1、由于试剂一易挥发，试剂一必须先预冷再加，研磨时必须在冰上研磨。

　　2、本试剂盒中试剂的挥发性较高，请带一次性手套和口罩。

　　注意事项

　　本产品仅作科研用途!

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