EdU-488细胞增殖检测试剂盒(适用于FACS、FM) 天津天正信达供应 核酸染料是一种超灵敏、极其稳定且对环境安全的荧光核酸染料，可替代剧毒的溴化乙锭 (EB)， 核酸染料是一种的油性大分子，不能穿透细胞膜进入细胞内。

EdU-488细胞增殖检测试剂盒(适用于FACS、FM)

产品信息 

产品描述

      EdU-488细胞增殖检测试剂盒(FuHeng EdU Cell Proliferation Kit with AlexaFluor 488)，是一种利用核苷渗入法对细胞增殖情况进行快速、 简单、高灵敏检测的试剂盒。其原理为：试剂盒中的EdU(5-ethynyl-2' -deoxyuridine)是一种胸苷(T)类似物，EdU可以在在 细胞周期的S期中替代胸苷掺入到新合成的DNA中；另一方面，EdU上的乙炔基能与叠氮 化物(如荧光探针Alexa Fluor 488 Azide)通过Cu+的催化发生共价反应，形成稳定的三唑 环，该反应非常迅速，被称作点击反应(Click reaction) (图1) 。通过点击反应，新合成的DNA会被绿色荧光标记，然后通过检测荧光信号实现细胞增殖的检测。

图1. EdU法中的点击反应原理图。 掺入到细胞DNA中的EdU与荧光探针或sws等标记的叠氮化物，在铜离子的催化下发生共价反应，形成稳定的三唑环，使细胞DNA标记上荧光探针或sws。

<p    细胞增殖检测是评估细胞活性、遗传毒性及抗肿瘤药物效果等的基础实验手段。 细胞增殖检测的方法按照原理通常可以分为五类：膜损伤检测、代谢活性检测、ATP水平测定、 DNA合成检测和细胞荧光标记检测法。目前的的检测细胞增殖的方法是直接检测细胞中DNA的合成，即核苷渗入法。以前常用的核苷渗入法是BrdU(胸腺嘧啶核苷酸类似物)法，但BrdU法的缺点是需要变性DNA后才能与抗体结合，导致了DNA双链结构的破坏，影响了其他染料的结合染色，导致染色弥散，准确性降低等问题。 EdU法作为新型的核苷渗入法具有以下优点：

◆安全-----不使用[3H]thymidine，无放射性污染。

◆ 简单-----基于小分子化学反应的检测方法，简单高效，仅需三步： EdU孵育；细胞固定；荧光检测。无需DNA变性和孵育抗体。

◆ 快速-----无需过夜，省却抗原抗体反应。整个检测过程只需 2.5 小时，大大缩短实验周期。

◆ 准确-----标记率高且无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)，可有效避免变性带来的样品损伤，确保细胞核边缘清晰完。

◆ 灵敏-----无需抗体，检测染料仅为BrdU抗体的1/500，更容易扩散，即使单个增殖细胞也能准确检测。

◆ 兼容-----对样品几乎无损伤，允许与多种抗体或荧光蛋白同时标记，能够同时检测细胞其他性状特征。

本试剂盒适用于培养的细胞或组织样品，也适用于组织切片，可以检测到细胞或组织样本中的单个增殖细胞，也可以对细胞或组织样本总体的细胞增殖情况进行定量分析。本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组份，同时提供了蓝色细胞核染料Hoechst 33342，可以用来复染所有细胞核，也可用于细胞周期分析。使用本试剂盒所做结果可以用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪或荧光酶标仪进行检测， 也可以用于高内涵筛选(High-Content Screening, HCS)。

光谱特性：488-Azide：绿色荧光，Ex/Em=491/518 nm；Hoechst 33342：蓝色荧光， Ex/Em=346/460nm, bound to DNA。

产品组分

运输和保存方法

-20℃保存， 一年有效。488-Azide和Hoechst 33342(1000X)须避光保存。

使用方法

1. 需自备试剂

（1）10mM PBS, pH7.2-7.6

（2）固定液-----4%多聚甲醛in PBS 。

（3）洗涤液-----3% BSA in PBS , pH7.2-7.6。

（4）通透液-----0.3~0.5% Triton X-100 in PBS。

（5）去离子水或超纯水。

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