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产品信息
产品名称
产品编号
规格
Agarose琼脂糖
HRF1011
100 g
HRF1012
500 g
产品描述
琼脂糖(Agarose)是纯化的线性半乳聚糖亲水胶体,提取自琼脂或者含琼脂的海藻,结构上是一种线性聚合物,由β-D-吡喃半乳糖(1-4)连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基构成。作为一种凝胶试剂,常用于通过凝胶电泳或者印迹法(如Northern或Southern)来进行日常核酸分析,也适用于蛋白应用,如辐射状免疫扩散(RID)实验。琼脂糖的基本参数,包括:1)硫酸盐含量(sulfate content)——纯度指标,因为硫酸根是存在琼脂糖内的主要离子基团;2)凝胶强度(gel strength)——施加于凝胶使之断裂的外力;3)胶凝点(Gel point)——水溶性琼脂糖溶液冷却后形成凝胶时的温度。液体向凝胶转化的过程中,琼脂糖溶液具有滞后性,因此,胶凝点不等同于胶熔点;4)电渗(EEO)——液体穿透凝胶的一种电动运动。琼脂糖凝胶内的阴离子基团吸附在基质上不会发生迁移,但是解离的阳离子就会朝负极迁移,从而产生电渗。由于生物聚合物的电泳迁移通常是朝负极运动,则EEO产生的内部对流会干扰分离效率。
产品性质
CAS号(CAS NO.)
9012-36-6
外观(Appearance)
白色至类白色粉末
凝胶强度(Gel Strength, 1.0%)
≥1200 (g/cm2)
胶凝温度域(Geling Range, 1.5%)
36±1.5℃
熔胶温度域(Melting Range, 1.5%)
88±1.5℃
电渗值(EEO, -mr)
≤0.13
硫酸盐(Sulfate, %)
≤0.15%
水分(Moisture)
≤10%
DNA酶(DNase)
None Detected
RNA酶(RNase)
蛋白酶(Protease)
运输和保存方法
室温运输和保存即可。有效期5年。
操作流程:
1.凝胶制备方法
1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液。根据电泳需要,配置合适浓度的电泳及制胶缓冲液。
注:用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的。
2.根据制胶量及凝胶浓度,在加有一定量的电泳缓冲液的三角锥瓶中,加入准确称量的琼脂糖粉(总液体量不宜超过三角锥瓶的 50%容量)。
2.在微波炉中加热溶解琼脂糖,设置高火加热至沸腾,保持胶液沸腾约 30 秒钟,戴上防热手套,移开三角锥瓶,小心摇动三角锥瓶,重悬未溶解颗粒,再次用高火加热 1-2 分钟,或直至琼脂糖溶解。请戴上防热手套,小心摇动三角锥瓶,使琼脂糖胶液充分均匀。
注:必须保证琼脂糖充分溶解,此时琼脂糖胶液清澈,否则,会造成电泳图像模糊不清。
加热时如胶液剧烈沸腾发泡,停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。
4.使溶液冷却至 60℃左右,如需要可在此时加入溴化乙锭(EB)溶液使其终浓度为0.5ug/ml,
并充分混匀。
注:溴化乙锭是一种致癌物质。使用含有溴化乙锭的溶液时,请戴用手套。
5.将琼脂糖溶液倒入制胶模中,然后在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在 3-5mm 之间。
6.在室温下使胶凝固(大约 30 分钟-1 小时),然后放置于电泳槽中进行电泳。
注:凝胶不立即使用时,请用保鲜膜将凝胶包好后在 4℃下保存,一般可保存 2~5 天。
本产品仅作科研用途!
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