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克隆与突变
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产品信息
产品名称
产品编号
规格
T4 DNA Ligase(5U/μL)
HRF0202
100 U
HRF0203
300 U
产品说明
T4 DNA Ligase(5U/μL)是从表达T4 DNA Ligase 基因的大肠杆菌经诱导表后分离纯化而来的。它催化相邻DNA链的的5' -磷酸末端和3'-羟基末端以磷酸二酯键结合反应。该酶催化平滑末端或粘性末端DNA的连接,修复双链DNA、RNA、DNA/RNA 杂交中的单链中的单链切口。
适用范围
1.DNA片段和载体DNA快速连接:
2.限制酶切片段的克隆;
3.将DNA片段与Linker或Adaptor连接。
缓冲液
酶贮存缓冲液:20mM Tris-HCl (pH7.5),0.1 mM EDTA,1mM DTT,50 mM KCl,50% glycerol。
10×Ligation Buffer:400 mM Tris-HCl,100 mM MgCl2,100 mM DTT,5 mM ATP (pH7.8),其他成分。
建议连接反应体系:(以10 μL反应体系为例)
标准反应管
阳性对照管
Vector
μL
PCR产物
n μLl**
/
对照插入DNA片段
1 μL
T4 DNA连接酬(5U/ul)
2-5 U
10×Ligation Buffer
加去离子水至终体积
10 μL
反应循环的设置
粘端连接: 22℃反应10分钟(可根据需要延长到1小时)
平端连接: 22℃反应2小时或16°C过夜。
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃ (保存6个月)。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
2)本产品仅作科研用途!
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