小鼠组织直接PCR试剂盒天津天正信达供应 核酸染料是一种超灵敏、极其稳定且对环境安全的荧光核酸染料，可替代剧毒的溴化乙锭 (EB)， 核酸染料是一种的油性大分子，不能穿透细胞膜进入细胞内。

小鼠组织直接PCR试剂盒

产品描述

本试剂盒可直接快速地对小鼠组织（如鼠尾、鼠耳、鼠趾、肌肉等）样本进行PCR扩增，具有的样本兼容性。本试剂盒配备了强力的裂解缓冲液，可以快速裂解样品，释放基因组DNA。裂解液可以直接加入到PCR反应体系中，无需精提纯化，操作方便。此外，本试剂盒对样品投入量要求低，5 mg小鼠组织或1-5 mm鼠尾即可进行实验。

本试剂盒提供的2× Mouse Direct PCR Mix为2倍浓度的热启动PCR反应液，包含了用于PCR扩增除模板和引物外的所有组分，大大简化操作过程，降低污染几率。

该试剂盒可用于转基因鉴定、小鼠基因分型等。

产品组分

a)Buffer ML 为裂解缓冲液，包含了强力蛋白变性剂，请戴手套操作。

b)Buffer MT 为终止缓冲液，用以终止Buffer ML的裂解功能。

c)2× Mouse Direct PCR Mix：包含热启动Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应增强剂、优化剂、稳定剂和电泳指示染料等。

运输方法

冰袋运输。

保存方法

组分A：2-8℃保存，有效期1年。使长时间多次使用，请分装冻存，避免交叉污染。

组分B/C：-20℃保存，避免反复冻融。有效期1年。

小鼠组织直接PCR试剂盒 操作方法

样品基因组DNA释放

1. 剪取5-10 mg动物组织或1-5 mm鼠尾，置于1.5 mL离心管中；

2. 在上述离心管中加入90 μL Buffer ML，轻轻涡旋使得样品被裂解液浸润，短暂离心；

3. 在恒温孵育仪中设置95℃孵育15 min；

4. 加入10 μL Buffer MT，轻弹混匀，终止裂解;

5. 选做步骤：12000 rpm离心2 min；

6. 将上清转移至新的离心管，4℃或-20℃保存或直接取上清用于后续PCR扩增。

【注】：组织应尽量剪碎，以便裂解反应更顺利进行。

【注】：95℃孵育，一般15 min即可满足多数PCR需求。若需要的DNA量较大或样品较难裂解，可将时间延长至30 min。组织块不需裂解，残余的部分在后续离心步骤中可被除去。

PCR反应鉴定——PCR反应体系

【注】：各组分使用前应充分混匀。

a）模板使用量：建议按1-10%总体系量取用模板，20 μL体系建议采用1 μL上清液作为模板；

b）引物终浓度：0.2-0.4 μM可以得到较好结果。反应性能较差时，可在0.1-0.5 μM范围内调整引物浓度；

c）反应体系：推荐使用20 μL，也可根据使用习惯调整体系体积大小；

d）体系配制：配制好PCR反应体系，置于涡旋仪上涡旋混匀，瞬时离心将反应液集于管底。

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