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BCA蛋白浓度测定试剂盒（即用型）

描述：

BCA蛋白浓度测定试剂盒（即用型）天津天正信达供应核酸染料是一种超灵敏、极其稳定且对环境安全的荧光核酸染料，可替代剧毒的溴化乙锭 (EB)，核酸染料是一种的油性大分子，不能穿透细胞膜进入细胞内。

更新时间：2025-03-24

产品型号：HRX0119

所在城市：天津市

厂商性质：经销商

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品牌	HERUI荷瑞	产地	国产
级别	其他

BCA蛋白浓度测定试剂盒（即用型） 产品信息

产品名称	产品编号	规格	价格（元）
BCA Protein Assay Kit (BCA蛋白浓度测定试剂盒)	HRX0119	500T	288
BCA Protein Assay Kit (BCA蛋白浓度测定试剂盒)	HRX0120	2500T	818

产品描述

本产品是一种即用型的总蛋白浓度测定试剂盒，由一系列确定浓度的蛋白质标准溶液组成。BCA试剂盒可通过测量562nm处的吸光度并与蛋白标准物的吸光度-浓度曲线进行比较，快速测定总蛋白浓度。蛋白质定量过程可以在45分钟内完成。
该产品基于BCA (Bicin -choninic Acid) 法研制而成，实现了对蛋白质进行快速、稳定、灵敏的浓度测定。其原理是在碱性环境下蛋白质分子中的肽链结构能与Cu²⁺络合生成络合物。同时将Cu²⁺还原成Cu⁺。该测定法的紫色反应产物是由两个BCA分子与一个亚铜离子螯合形成的。这种水溶性复合物在562nm处表现出很强的吸光度，在较宽的工作范围 (20-2,000μg/ ml) 中，随着蛋白质浓度的增加，吸光度几乎呈线性。
BCA方法不是真正的端点方法，也就是说最终颜色会继续变化。但是孵育后颜色变化的速度足够慢可以允许分析大量的样品。据报道蛋白质的大分子结构，肽键的数量以及四种特定氨基酸 (半g氨酸、g氨酸、s氨酸和l氨酸) 的存在与BCA的颜色形成有关。对二肽、三肽和四肽的研究表明颜色形成的程度不仅仅是由单个产生颜色的官能团的总和引起的。
因此通常参考诸如牛血清白蛋白 (BSA) 的常见蛋白质的标准来确定待测蛋白质浓度。一系列确定浓度的蛋白质标准溶液与待测物一起进行测定，然后根据标准曲线确定每个待测物的浓度。如果需要精确定量待测蛋白质，建议选择质量与待测蛋白质相似的蛋白质标准品。例如在测定免疫球蛋白样品时，可以使用牛γ球蛋白 (BGG) 标准品。在介绍的两种检测法中，其中试管检测法需要更大体积 (0.1mL) 的蛋白质样品，但是由于它使用的样品与工作试剂之比为1:20 (v / v)，因此干扰物质的影响降至低。

产品特性

组分	500 tests	2500 tests
BCA Reagent A	100 mL	500 mL
BCA Reagent B	3 mL	5 mL × 3
BSA 标准品①（0 μg/mL）	1 mL	1 mL × 5
BSA 标准品②（25 μg/mL）	1 mL	1 mL × 5
BSA 标准品③（125 μg/mL）	1 mL	1 mL × 5
BSA 标准品④（250 μg/mL）	1 mL	1 mL × 5
BSA 标准品⑤（500 μg/mL）	1 mL	1 mL × 5
BSA 标准品⑥（750 μg/mL）	1 mL	1 mL × 5
BSA 标准品⑦（1000 μg/mL）	1 mL	1 mL × 5
BSA 标准品⑧（1500 μg/mL）	1 mL	1 mL × 5
BSA 标准品⑨（2000 μg/mL）	1 mL	1 mL × 5

使用方法

A.试管配制

1.以50:1的比例混合BCA试剂A和BCA试剂B。即将50ml BCA试剂A与1ml BCA试剂B混合。
注意: 使用以下公式确定所需工作试剂的总量： (标准品+待测样品) x (重复次数) x (每个样品所需要的BCA工作液) =所需BCA工作液总体积。
2.将100μL每种标准品和待测蛋白质分别添加到单独的标记好的试管中，如表1。

表1：白蛋白(BSA)标准品

孔编号	A	B	C	D	E	F	G	H	I
添加物	标准品①	标准品②	标准品③	标准品④	标准品⑤	标准品⑥	标准品⑦	标准品⑧	标准品⑨
体积（μL）	100	100	100	100	100	100	100	100	100
BSA终浓度（μg/mL）	0	25	125	250	500	750	1000	1500	2000

3.在每个试管中加入2 ml BCA工作试剂并充分混合。
4.在37°C下孵育30分钟。
注意：增加孵育时间和温度会增加每次测试的净562 nm吸光度, 并同时降低试剂盒的低检测水平和试范围.
5.将所有管子冷却到室温(RT)。
6.将分光光度计的波长设置为OD 562nm。用水将仪器校准为零。随后在10分钟内测量所有样品的吸光度。
注意: 即使冷却至室温后，色彩仍会继续显影。但是，如果所有吸光度测量均在10分钟内进行，则随后在RT处的显影太弱而不会产生明显的误差。
7.从所有读数中减去空白的OD562。
8.绘制BSA标准曲线: OD562 (Y轴) vs BSA标准浓度 (X轴)。使用标准曲线确定每个待测样品的蛋白质浓度。

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