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GUS染色液(即用型)
产品名称
产品编号
规格
HR0258
50mL
HR0258-100mL
100mL
产品描述
GUS (β -Galactosidase, β -半乳糖苷酶) 基因是存在于 E.coli 等一些细菌基因组内的编码 β-葡萄糖苷酸酶的一种水解酶,该基因常作为融合标记用于植物转基因分析和调控研究中。 GUS受体基因系统有表达 E.coli GUS 酶的稳定性和在植物内的低活性,绝大多数植物没有检测到葡萄糖苷酸酶的背景活性,以β-葡萄糖苷酸酯类物质为底物,其反应产物可用多种方法检测出来。5-Bromo- chloro-3-indolyl β-D-glucuronide,cyclo hexylammonium salt(简称为X-G luc或 X-GlcA)分子 量为 521.8,CAS 号为18656-96-7,是检测大肠杆菌中GUS基因的底物,可快速检测植物中GUS基因融合标记。
β-葡萄糖苷酶基因染色试剂盒(β -Galactosidase Reporter Gene Staining Kit)简称为 GUS 染色液 ,其染色原理是适宜的反应条件下 β -葡萄糖苷酶(GUS)可将 X-G luc水解成蓝色物质, 该物质不溶解于转基因的细胞核组织中的靛蓝物质 ,具有 GUS 活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点,可用肉眼或显微镜观察到。GUS染色液可用于生物化学活性分析、免疫分析以 及组织和细胞的组织化学染色 ,多用于转基因植物的GUS基因表达分析。
该即用型试剂比常规 GUS染色液操作简便。
本产品仅用于科研领域,不用于临床诊断。
自备用品
1.70%乙醇
2.去离子水
3.小瓶或多孔板、显微镜
产品性质
名称
50ml
100ml
Storage
HR0258(A): X-G luc
1 支
2 支
-20℃ 避光
HR0258(B): X-G luc
Solution
1ml
2 × 1ml
RT
配制 X-G luc (50x)溶液 :取B加至A中 ,充分溶解 ,即获得X-G luc 溶液(50x)。
-20℃保存,1个月有效。避免反复冻融。
HR0258 (C): GUS
Buffer
4℃ 避光
配制 X-G luc 染色液:取适量 X-G luc (50x)溶液和 GUS Buffer,按1:49比例充分混匀 ,
该染色液现用现配,短期贮存可以4℃保存3天。
使用方法
1.取适量待染叶片等组织加入适量GUS染色液,使 GUS染色液浸没组织。
2.37℃孵育1-24h ,随着孵育时间的延长,蓝色渐渐出现,当表达量较高时,GUS活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点。
3.用 70%乙醇脱去样本的叶绿素 ,一般样本浸没于乙醇1~3h,至阴性对照呈白色。如有必要可重复该脱色步骤 ,以便清除叶绿素。样本保存于乙醇中,可用肉眼或普通光学显微镜下观察, 白色背景上的蓝色即为GUS表达位点。
注意事项
1.配制好的 GUS 染色液可以 4℃避光保存3 天。
2.由于组织特异性等原因 ,蓝色颜色反应可能不一致,请做预实验摸索实验条件。
3.拟南芥的根、花和叶片以及烟草幼苗根就可直接染色;烟草和马铃薯这些植物的茎和叶须在染色前切成薄片(1-3mm)。
4.当操作大的组织和样品时 ,可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞 ,建议采购常规 GUS 染色液。
5.本产品仅作科研用途!
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