无血清细胞冻存液,科研界的新宠,如果跟传统细胞保存方法对比?
无血清细胞冻存液是细胞培养技术中的一项创新,它摒弃了传统冻存液中的血清成分,转而采用其他营养成分,如葡萄糖、氨基酸等,同时含有适量的DMSO作为保护剂。这种冻存液不仅适用于各种常见和肿瘤动物细胞株,还能减少细菌、病毒和支原体等污染的风险,提高细胞冻存的存活率和复苏率。
使用无血清细胞冻存液,无需经过繁琐的程序降温过程,细胞可直接置于-80℃冰箱中长期保存,甚至可直接进行微量、原位冻存,极大地节省了时间和精力。此外,由于不含血清及动物源成分,各批次产品之间的质量一致性更高,降低了细胞污染的可能性。
以下是关于无血清细胞冻存液的系统性总结:
一、核心特性
成分优势
不含动物源蛋白和血清,避免病毒/支原体污染风险,适用于临床级细胞制剂制备
明确化学成分(含DMSO、葡萄糖等)确保批次稳定性,复苏活率普遍>80%
技术突破
玻璃化冻存技术可替代传统DMSO配方,实现-80℃直接冻存且无需程序降温
部分产品支持常温储运(如CELLSAVING冻存液),降低冷链成本
二、适用场景
细胞治疗领域
CAR-T、NK细胞等免疫细胞冻存,符合IND申报要求
干细胞(MSC)及原代细胞保存,减少异源成分干扰
常规研究应用
肿瘤细胞系(Hela、A549等)及工程细胞(CHO、HEK293)长期保存
无血清培养体系衔接,避免血清引入的变量干扰
三、操作要点
冻存流程
1. 细胞消化后离心(1000rpm, 5min)弃上清
2. 用预冷冻存液重悬(推荐密度5×10⁵-1×10⁷ cells/mL)
3. 分装至冻存管,直接转移至-80℃(玻璃化产品)或渐进降温
复苏注意事项
37℃水浴快速解冻后需立即用5倍体积培养基稀释
对DMSO敏感细胞(如原代细胞)需预先测试冻存效果
四、产品选择指南
参数 推荐标准 代表产品
冻存温度 -80℃直接保存(玻璃化技术优先) 玻璃化冻存液
有效期 ≥24个月(4℃保存) CELLSAVING
认证要求 优先选择NMPA/FDA备案产品 OptiVitro系列
(注:实验前需验证目标细胞适配性,非常规细胞建议先试用小样)
目前,市场上已有多种无血清细胞冻存液产品,如SERZNA、BUNSEN本生等,它们均得到了广泛认可和应用,为细胞保存和研究提供了更多选择。
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