高保真酶预混液基本信息汇总
高保真酶预混液是一种用于PCR扩增的即用型试剂,具有高保真性、高特异性和高效性,广泛应用于分子生物学实验。以下是其主要特点和应用场景:
1. 主要特点
高保真性:采用高保真DNA聚合酶(如Q5、Hieff Canace®等),其保真性是Taq DNA聚合酶的83倍,普通Pfu DNA聚合酶的9倍,显著降低错配率。
热启动设计:通过单克隆抗体抑制聚合酶活性,减少非特异性扩增,提高反应特异性。
长片段扩增能力:可扩增长达13 kb的DNA片段,适用于复杂模板的扩增。
即用型设计:预混液包含dNTPs、缓冲液和染料,只需加入引物和模板即可进行PCR,简化实验步骤。
稳定性好:含有特异保护剂,反复冻融后仍能维持稳定活性。
2. 应用场景
基因克隆与组装:适用于无缝克隆、多片段DNA组装和定点突变等实验。
二代测序(NGS)文库制备:优化用于NGS文库扩增,提高文库均一性和产量,尤其在GC富集区域表现优异。
复杂模板扩增:适用于高GC含量、复杂二级结构的模板扩增。
高通量实验:适用于批量样本处理,提高实验效率。
3. 常见品牌与产品
NEBuilder® 高保真 DNA 组装预混液:用于无缝组装多个DNA片段,无需PCR纯化步骤,适合合成生物学和多片段克隆。
NEBNext® Ultra™ II Q5® 预混液:专为NGS文库扩增优化,具有超高保真度和热启动特性。
Hieff Canace® Gold PCR Master Mix:即用型预混液,适用于长片段扩增和高保真PCR。
4. 选择建议
实验需求:根据实验类型(如克隆、测序或复杂模板扩增)选择合适的产品。
保真性要求:对于高保真性要求的实验,优先选择保真性更高的酶(如Q5或Hieff Canace®)。
操作便捷性:选择即用型预混液,简化实验步骤,提高效率。
高保真酶预混液凭借其高保真性、热启动设计和长片段扩增能力,已成为分子生物学实验中的工具。
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