人低密度脂蛋白受体相关蛋白1B(LRP1B)ELISA试剂盒说明书概要 一、产品基本信息 产品名称:人低密度脂蛋白受体相关蛋白1B(LRP1B)ELISA试剂盒 用途:用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清液等人源样本中的LRP1B浓度,仅限科研实验使用。 规格:48T/96T(T代表测试次数或孔数)。 保质期:一般为6个月至12个月,具体以试剂盒外包装标签为准。 二、试剂盒组成 预包被酶标板:含有固定量的抗LRP1B抗体。 标准品:用于绘制标准曲线,已知浓度的LRP1B蛋白溶液。 样本稀释液:用于稀释样本,以便在检测范围内进行测量。 检测抗体:标记有酶(如辣根过氧化物酶)的抗LRP1B抗体。 洗涤液:用于洗涤酶标板,去除未结合的物质。 底物:如TMB,与酶反应产生颜色变化,用于检测。 终止液:停止酶反应,使颜色变化稳定。 使用说明书:详细操作步骤、注意事项等。 三、检测原理 采用抗体夹心法:样本中的LRP1B与预包被在酶标板上的抗体结合,再加入标记有酶的抗LRP1B抗体形成复合物。经过洗涤去除未结合的物质后,加入底物产生颜色变化。颜色深浅与样本中的LRP1B浓度呈正相关,通过酶标仪测量吸光度值,计算样本浓度。 四、样本准备与保存 样本收集:使用无热原、无内毒素的试管收集血清或血浆样本,避免溶血、高血脂样本。组织匀浆或细胞上清液样本需离心去除沉淀。 样本保存:样本应尽早检测,若不及时检测,应分装后冷冻保存(-20℃或-80℃),避免反复冻融。 五、操作步骤 加样:向酶标板中加入标准品和稀释后的样本。 孵育:在温度和时间内孵育,使样本中的LRP1B与抗体结合。 洗涤:使用洗涤液洗涤酶标板,去除未结合的物质。 加检测抗体:向酶标板中加入标记有酶的抗LRP1B抗体,孵育。 再次洗涤:重复洗涤步骤。 加底物显色:向酶标板中加入底物,孵育使颜色发展。 终止反应:加入终止液停止反应。 读板:使用酶标仪在波长下测量吸光度值。 六、注意事项 严格按照说明书操作,避免交叉污染。 加样时应确保每孔体积一致,避免产生气泡。 孵育时间和温度需严格控制。 洗涤步骤应充分且。 读取结果时应在终止反应后的规定时间内进行。 |